martes, 9 de diciembre de 2014

TINCION DE GIEMSA :

-MATERIAL: 

  • Microscopio 
  • Portas
  • Cristalizador
  • Puentes de tincion 
  • Pipetas pasteur con chupete
  • Frascos lavadores
  • Tubos de ensayo 
-REACTIVOS:
  1. Colorante en solución según Giemsa 
  2. Solución tampon 7.2 
  3. Metanol
  4. Aceite de Inmersión.
-MUESTRA:
Sangre capilar o venosa anticoagulada.

- TÉCNICA:

  • Preparamos una extension de sangre .
  • Colocamos el frotis sobre el puente de tincion, en el cristalizador y en posicion vertical.
  • Cubrimos la extension con metanol durante 3 minutos. Escurrimos y los dejamos secar.
  • Diluimos en un tubo de ensayo 0.2 ml de Giemsa con 2 ml de tampon 7.2.
  • Mezclamos suavemente en un tubo y con una pipeta pasteur cubrimos el frotis con la dilucion de colorante ,dejando actuar 25 minutos. 
  • Escurrimos y lavamos con agua de grifo, despues lavamos con tampon 7.2 hasta que deje de salir el liquido teñido . dejamos secar en posicion vertical.
  • Una vez secado , depositamos una gota de aceite en el porta y observamos al microscopio con el objetivo 100x .
-RESULTADOS:
Se observan los eritrocitos de color rosado, y plaquetas color violeta
Los neutrofilos de color azul  violeta en el nucleo,y citoplasma de color rosa y granulaciones de cojor rojo.
Los eosinofilos se observa un nucleo de color azul violeta ,citoplasma azul y granulos de color anaranjado.
Los basofilos de color purpura en el nucleo y granulaciones de color azul oscuro.
Los monocitos y linfocitos se observan con un nucleo de color violeta ,citoplasma de azul y un poco mas claro los monocitos.

HOJA DE TRABAJO:
  1. ¿Cuales son los anticoagulantes mas adecuados para esta técnica? - Heparina y EDTA.
  2. ¿Con que reactivo fijamos la extensión ? - Metanol.
  3. ¿Cuanto tiempo debe actuar el colorante en la extensión? -  25 minutos.

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