- Microscopio
- Portas
- Cristalizador
- Puentes de tincion
- Pipetas pasteur con chupete
- Frascos lavadores
- Tubos de ensayo
-REACTIVOS:
- Colorante en solución según Giemsa
- Solución tampon 7.2
- Metanol
- Aceite de Inmersión.
-MUESTRA:
Sangre capilar o venosa anticoagulada.
- TÉCNICA:
- Preparamos una extension de sangre .
- Colocamos el frotis sobre el puente de tincion, en el cristalizador y en posicion vertical.
- Cubrimos la extension con metanol durante 3 minutos. Escurrimos y los dejamos secar.
- Diluimos en un tubo de ensayo 0.2 ml de Giemsa con 2 ml de tampon 7.2.
- Mezclamos suavemente en un tubo y con una pipeta pasteur cubrimos el frotis con la dilucion de colorante ,dejando actuar 25 minutos.
- Escurrimos y lavamos con agua de grifo, despues lavamos con tampon 7.2 hasta que deje de salir el liquido teñido . dejamos secar en posicion vertical.
- Una vez secado , depositamos una gota de aceite en el porta y observamos al microscopio con el objetivo 100x .
-RESULTADOS:
Se observan los eritrocitos de color rosado, y plaquetas color violeta
Los neutrofilos de color azul violeta en el nucleo,y citoplasma de color rosa y granulaciones de cojor rojo.
Los eosinofilos se observa un nucleo de color azul violeta ,citoplasma azul y granulos de color anaranjado.
Los basofilos de color purpura en el nucleo y granulaciones de color azul oscuro.
Los monocitos y linfocitos se observan con un nucleo de color violeta ,citoplasma de azul y un poco mas claro los monocitos.
HOJA DE TRABAJO:
- ¿Cuales son los anticoagulantes mas adecuados para esta técnica? - Heparina y EDTA.
- ¿Con que reactivo fijamos la extensión ? - Metanol.
- ¿Cuanto tiempo debe actuar el colorante en la extensión? - 25 minutos.
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