- Pipeta diluidora de Thoma ,para recuento de glóbulos rojos.
- Un tubo de goma con boquilla,adaptable a la pipeta diluidora.
- Una cámara de recuento, con un retículo tipo Neubauer mejorado.
- Un cubre.
- Microscopio.
REACTIVOS:
Liquido de dilucion . Este debe ser isotónico con el plasma, para evitar la alteración morfológica e incluso la lisis de los hematíes.
El mas utilizado es HAYEM.
Si contiene precipitados, antes de usarlo se debería de filtrar.
MUESTRA:
Sangre obtenida por punción del pulpejo de un dedo o sangre venosa procedente de una punción venosa y anti coagulada con EDTA.
FUNDAMENTO:
Para el recuento en cámara de glóbulos rojos, se diluye la sangre problema en un liquido apropiado y posterior se deposita en la cámara de recuento , donde se cuentan las células presentes en algunos cuadrados de uno de los retículos.
TÉCNICA:
- Situar un cubre sobre el retículo de la cámara. Para facilitar su adhesión a esta , se ejerce una ligera presión al tiempo que se desliza el cubre sobre las bandas laterales ,Humedecemos con agua de su porción central.
- Aspiramos la sangre hasta 0.5 si creemos que es policitemia. o 1ml si pensamos que sufre anemia.
- Limpiar con cuidado el exterior de la pipeta con un algodón y sin hacer bajar el nivel de sangre.
- Aspirar liquido diluyente hasta la señal 101.
- Desechar el tubo de goma de la pipeta y homogeneizar el contenido del bulbo.Para ello se sujeta la pipeta del extremo, con los dedos pulgar e indice y se agita suavemente en sentido horizontal durante 2 o 3 minutos.
- Desechamos las 3 primeras gotas, ya que contienen liquido presente en el tubo capilar largo de la pipeta Thoma, que no esta mezclado con la sangre.
- Depositar la siguiente gota entre la cámara y el cubre . Esto se realiza hubicandola en uno de los bordes adheridos del cubre y dejándola que entre por capilaridad en el espacio existente entre ambas estructuras,hay que evitar que se formen burbujas y que rebose la sangre por fuera de los bordes del cubre.
- Dejar reposar la sangre diluidora contenida en la cámara durante unos minutos para que las células presentes sedimenten.
- Enfocar el retículo con el objetivo de 40 x y con el condensador a baja altura , verificar que la distribución de los hematíes es homogénea.
- Contar los hematíes presentes en 80 cuadrados pequeños del cuadrado grande central.
LECTURAS DE RESULTADOS:
Como se cuentan los hematies presentes en 5 cuadrados medianos del cuadrado grande central , y este tiene 25 cuadrados medianos, multiplicamos x5 la cifra obtenida en el recuento, para calcular el numero de hematies qur hay en un cuadrado grande.
Como la longitud de cada uno de los lados del cuadrado grande central es 1mm y de longitud entre el cubre y este es de 0.1 mm , multiplicaremos x 10.
Como la sangre,se diluye hay que multiplicar el resultado anterior por 100, solo cuando la sangre sea 1mm.
RBC= H x 5 x 10 x D
RBC... recuento de hematíes.
H ... hematíes contados en 5 cuadrados medianos.
D.... factor de dilucion..
INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS:
La disminución del RBC se produce en las ANEMIAS y su aumento se da en las POLICITEMIAS.
Se considera normal un RBC comprendido entre los 4 y los 5.5 millones / mm cúbicos en las mujeres y entre los 4.5 y los 6 millones /mm cúbicos en varones.
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